Novi komplet za otkrivanje nukleinskih kiselina za koronavirus (SARS-Cov-2).

New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit

(Flurudescent RT-PCR Probe Method) Product Manual

【Product name 】Novi komplet za otkrivanje nukleinskih kiselina (SARS-Cov-2) (Fluorescentna RT-PCR metoda sonde)

【Packaging specifications 】25 testova/komplet

【Intended usgodine】

Ovaj komplet se koristi za kvalitativnu detekciju nukleinske kiseline iz novog koronavirusa u brisevima nazofarinksa, orofaringealnih (grla), prednjih nazalnih briseva, srednjih nosnih briseva, ispiranja nosa i nazalnih aspirata od osoba za koje zdravstveni djelatnik sumnja da su zaraženi COVID-19. Detekcija ORF1ab i N gena novog korona virusa može se koristiti za pomoćnu dijagnostiku i epidemiološko praćenje nove infekcije koronavirusom.

【Principles of the procedure 】

Ovaj komplet je dizajniran za specifične TaqMan sonde i specifične prajmere dizajnirane za ORF1ab i N genske sekvence novog koronavirusa (SARS-Cov-2). PCR reakcijski rastvor sadrži 3 seta specifičnih prajmera i fluorescentnih sondi za specifičnu detekciju ciljeva, a dodatni set specifičnih prajmera i fluorescentnih sondi se koristi kao interna standardna kontrola kompleta za detekciju endogenih gena za održavanje domaćinstva.

Princip testa je da se specifična fluorescentna sonda razgradi i razgradi eksonukleaznom aktivnošću Taq enzima u PCR reakciji, tako da se reporterska fluorescentna grupa i ugašena fluorescentna grupa razdvoje, tako da sistem za praćenje fluorescencije može primiti fluorescentnu grupu. signala, a zatim Kroz efekat obogaćivanja PCR amplifikacije, fluorescentni signal sonde dostiže postavljenu graničnu vrijednost-Ct vrijednost (Cycle threshold). U slučaju da nema ciljnog amplikona, reporterska grupa sonde je blizu grupe za gašenje. U ovom trenutku dolazi do prijenosa energije rezonancije fluorescencije, a fluorescencija reporterske grupe se gasi od strane grupe za gašenje, tako da fluorescentni signal ne može biti detektovan fluorescentnim PCR instrumentom.

Kako bi se pratila upotreba reagensa tokom testa, komplet je opremljen pozitivnim i negativnim kontrolama: pozitivna kontrola sadrži rekombinantni plazmid ciljnog mjesta, a negativna kontrola je destilirana voda koja se koristi za praćenje zagađenja okoliša. Preporučuje se istovremeno postavljanje pozitivne i negativne kontrole prilikom testiranja.

【Main components 】

Napomena：(1) Komponente u različitim serijama ne mogu se miješati ili mijenjati.

(2) Pripremite vlastiti reagens: komplet za ekstrakciju nukleinske kiseline.

【Storage conditions i expiration date 】

For BST-SARS-25:Transportujte i čuvajte na -20±5℃ dugo vremena.

For BST-SARS-DR-25:Transport na sobnoj temperaturi. Čuvati na -20±5℃ dugo vremena.

Izbjegavajte ponovljene cikluse zamrzavanja-odmrzavanja. Rok važenja je okvirno određen na 12 mjeseci.

Pogledajte etiketu za datum proizvodnje i upotrebe.

Nakon prvog otvaranja, reagens se može čuvati na -20±5 °C ne više od 1 mjesec ili do kraja perioda reagensa, koji god datum nastupi prije, kako bi se izbjegli ponovljeni ciklusi zamrzavanja-odmrzavanja i broj zamrzavanja reagensa -ciklusi odmrzavanja ne bi trebalo da prelaze 6 puta.

【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.

【Sample requirements 】

1. Primjenjivi tip uzorka: ekstrahirana otopina nukleinske kiseline.

2. Čuvanje i transport uzoraka: Čuvati na -20±5℃ 6 mjeseci. Zamrznite i odmrznite uzorke najviše 6 puta.

【Testing method】

1.Nucleic acid extraction

Odaberite odgovarajući komplet za ekstrakciju nukleinske kiseline za ekstrakciju virusne nukleinske kiseline i slijedite odgovarajuće upute za komplet. Preporučuje se korištenje kompleta za ekstrakciju i pročišćavanje nukleinske kiseline koji proizvodi Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. ili ekvivalentni komplet za pročišćavanje nukleinske kiseline.

2.  Reaction reagent preparation

2.1 For BST-SARS-25:

(1) Uklonite SARS-Cov-2 mješavinu i mješavinu enzima, potpuno otopite na sobnoj temperaturi, temeljito promiješajte pomoću Vortex uređaja, a zatim kratko centrifugirajte.

(2) 16,5 uL mešavine enzima je dodato u 358,5 uL mešavine SARS-Cov-2 i dobro promešano da bi se dobio mešani reakcioni rastvor.

(3) Pripremite čistu PCR oktalnu epruvetu od 0,2 mL i označite je sa 15 uL gornje miješane reakcijske otopine po jažici.

(4) Dodajte 15 μL pročišćene otopine nukleinske kiseline, pozitivnu i negativnu kontrolu i pažljivo pokrijte oktalnu kapicu epruvete.

(5) Dobro promiješajte okretanjem naopačke i brzo centrifugirajte kako biste koncentrirali tekućinu na dnu epruvete.

1