Komplet za ekstrakciju ili pročišćavanje nukleinske kiseline
Nucleic Acid Extraction Or Purification Kitili uskladišteno na -20℃. Uzorak treba transportovati pomoću uvijanja na 0℃.
Introduction
Komplet za ekstrakciju ili pročišćavanje nukleinske kiseline (metoda magnetnih kuglica) dizajniran je za automatsko prečišćavanje RNK i DNK iz tjelesnih tekućina (kao što su brisevi, plazma, serum) korištenjem automatiziranih instrumenata za ekstrakciju nukleinske kiseline. Tehnologija magnetnih čestica pruža visokokvalitetnu DNK/RNA koja je pogodna za direktnu upotrebu u nizvodnim aplikacijama kao što su amplifikacija ili druge enzimske reakcije.
Application Range
Uzorci pune krvi, plazme, seruma i drugih tkiva direktno su lizirani i digestirani. Oslobođena nukleinska kiselina je selektivno adsorbovana superparamagnetnim nanometarskim magnetnim kuglicama. Zatim su proteini, joni neorganske soli i organske nečistoće uklonjeni rastvorom za ispiranje. Na kraju, nukleinska kiselina je eluirana eluentom da bi se dobio čist rastvor nukleinske kiseline.
Kit Contents
Cat. br. | YXN-VIRAL01-32A-BR | Komponente | ||
-50A | - 100A | |||
Veličina | 32Tes | 50Test | 100Test | |
Lizni pufer | 96 bunarPrepak ed Ploče 2 komada | 25ml | 50ml | Surfaktant i Tris |
Pufer za pranje I | ★15ml | ★30ml | Rastvor sa visokim sadržajem soli | |
Pufer za pranje Il | ★6ml*2 | ★12ml*2 | Rastvor sa malo soli | |
Pufer za eluiranje | 10ml | 20ml | Rastvor sa malo soli | |
MagaBio reagens | 1.0ml | 2.0ml | Magnetne čestice | |
Priručnik(=YXN-VIRAL01-32A-BR) | 1 | 1 | 1 | |
Nnapomene:ZaYXN-VIRAL01-32A-BR-50A,dodajte 15mL apsolutnog etanola u ★15mL pufera za pranje I prije upotrebe; dodajte 24mL apsolutnog etanola u ★6mL pufera za pranje Il prije upotrebe. | ||||
ZaYXN-VIRAL01-32A-BR-100A, dodajte 30mL apsolutnog etanola u ★30mL pufera za pranje I prije upotrebe; dodajte 48mL apsolutnog etanola u ★12mL pufera za pranje Il prije upotrebe.【Reagensi koje treba pripremiti korisnik】Molimo sami pripremite apsolutni etanol (analitički stupanj). |
Storage Conditions
Po dolasku kompleta, komponente kompleta mogu se čuvati na sobnoj temperaturi (15 − 25°C). Reagensi su stabilni do godinu dana od datuma proizvodnje.
Sample Requirements
1. Primjenjivi uzorak: brisevi, plazma, serum i puna krv itd.
2. Čuvanje i transport uzorka: Uzorak treba odmah testirati
Materials i Devices Required but Not Provided
1. Jednokratne rukavice bez pudera
2. Kontejner za biološku opasnost
3. Olovka ili per
Procedure
U nastavku se koristi losion za ekstrakciju trake uzorka kao primjer da se ukratko objasne radni koraci reagensa za ekstrakciju na instrumentu za ekstrakciju biološke nukleinske kiselineBioer NPA-32PiliSMART 32. Za druge tipove uzoraka, pogledajte korisnički priručnik. Također mogu upravljati kupci prema eksperimentalnoj nabavci:
1. Reagens Priprema
a. ZaYXN-VB03-32A-50A i YXN-VB03-32A-100A
Dodajte 500 uL pufera za lizu u kolonu 1 i 7 2,2 mL ploče sa 96 dubokih jažica, 500 uL pufera za ispiranje I u kolonu 2 i 8, 500 uL pufera za ispiranje II u kolonu 3, 4 i 9,10; 70 uL pufera za eluiranje u kolonu 5 i 11, 180 uL čiste vode i 20 uL MagaBio reagensa za kolonu 6 i 12 (magnetne kuglice treba dobro promiješati prije upotrebe),
b. ZaYXN-VB03-32A
Stavite prethodno upakovane reagense sa 96 jažica na sobnu temperaturu. Tri puta protresite ploču sa 96 jažica naopako i otkinite plastičnu vrećicu. Centrifugirajte prethodno upakovani reagens nekoliko sekundi (ili zamahnite rukom nekoliko puta) kako biste izbjegli prianjanje reagensa na zid epruveta. Otkinite film od aluminijske folije sa ploče sa 96 jažica i odredite smjer ploče (magnetne perle u koloni #6 i #12),
2.Uzorak Ekstrakcija
1. Dodajte 300uL uzorka u kolone ploče sa 96 jažica #1 i #7, molimo izbjegavajte unakrsnu kontaminaciju,
2. Postavite ploču sa 96 dubokih bunara na instrument, postavite vrhove od 8 traka na instrument,
3. Pokrenite program prema sljedećim procedurama,
4. Nakon što je automatsko prečišćavanje završeno, prenesite pufer za eluiranje u kolonama 5 i 11 u čistu antinuklearnu epruvetu za centrifugu od 0,5 mL; ako ga ne koristite odmah, čuvajte na -20 °C.
Performance Characteristics
1. Ekstrahirani proizvod se detektuje visokoosjetljivim HBV DNK reagensom za detekciju kako bi se postigla osjetljivost od 10 IU/mL. Ekstrahirani proizvod detektuje se visokoosjetljivim HCV RNA reagensom za detekciju kako bi se postigla osjetljivost od 50 IU/mL.
2. Odaberite 4 uzorka (uzorak seruma/plazme, uzorak brisa nazofarinksa, uzorak eksfolijiranih ćelija grlića materice), svaki uzorak se razrijedi 10 puta sa 3 gradijenta (uključujući originalni uzorak od ukupno 4 koncentracije), koristeći kvalifikovane reagense i sredstva za testiranje za otkrivanje unutrašnjih referentni gen prema uputama za proizvod, a vrijednost Ct svake serije razlikuje se za manje od 1.
Step | Pa Lokacija | Program Ime | Waiting Time(min:SS) | Mixing Time(mu:SS) | Magnet Time(min:SS) | Adsorpcija | Speed | Volume tatus (μL) | Ttemperatura |
1 | 1 | Lysis | 0:00 | 2:00 | 0:00 | F | 700 | 80 | |
2 | 6 | Beads | 0:00 | 0:15 | 0:15 | √ | F | 200 | |
3 | 1 | Bind | 0:00 | 3:00 | 0:45 | √ | F | 700 | |
4 | 2 | Wash1 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
5 | 3 | Wash2 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
6 | 4 | Wash3 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
7 | 5 | Elucija | 2:00 | 2:30 | 0:30 | F | 70 | 80 | |
8 | 6 | Odbaci | 0:00 | 0:15 | 0:00 | F | 200 |
Safety
1. GENERAL SIGURNOST.
Korištenje ovog proizvoda na način koji nije naveden u korisničkoj dokumentaciji može dovesti do ozljeda ili oštećenja instrumenta ili uređaja. Uvjerite se da je svako ko koristi ovaj proizvod dobio upute o općim sigurnosnim praksama za laboratorije i sigurnosne informacije navedene u ovom dokumentu.
1.1 Prije upotrebe instrumenta ili uređaja, pročitajte i razumite sigurnosne informacije navedene u korisničkoj dokumentaciji koju je dostavio proizvođač instrumenta ili uređaja.
1.2 Prije rukovanja hemikalijama, pročitajte i razumite sve primjenjive sigurnosne listove (SDS) i koristite odgovarajuću ličnu zaštitnu opremu (rukavice, ogrtači, zaštita za oči, itd.). Da biste dobili SDS, pogledajte odjeljak “Dokumentacija i podrška” u ovom dokumentu.
2. Hemijski sigurnost
OPĆE RUKOVANJE HEMIJSKIM. Da biste smanjili opasnosti, osigurajte da laboratorijsko osoblje pročita i prakticira opće sigurnosne smjernice za upotrebu, skladištenje i otpad hemikalija koje su navedene u nastavku, i konsultujte relevantni SDS za posebne mjere opreza i uputstva: Pročitajte i razumite listove sa sigurnosnim podacima (SDS) koje daje kemikalija proizvođača prije nego što skladištite, rukujete ili radite s bilo kojim kemikalijama ili opasnim materijalima.
2.1 Smanjite kontakt sa hemikalijama. Nosite odgovarajuću ličnu zaštitnu opremu kada rukujete hemikalijama (na primjer, zaštitne naočale, rukavice ili zaštitnu odjeću).
2.2 Smanjite udisanje hemikalija. Ne ostavljajte otvorene posude za hemikalije. Koristite samo uz odgovarajuću ventilaciju (na primjer, napa).
2.3 Redovno proveravajte da li hemikalije propuštaju ili prosipaju. Ako dođe do curenja ili izlijevanja, slijedite proizvođačeve procedure čišćenja kako je preporučeno u SDS-u.
2.4 Rukovati hemijskim otpadom u odvodu.
2.5 Osigurati korištenje primarnih i sekundarnih kontejnera za otpad. (Primarni otpad
kontejner sadrži neposredni otpad. Sekundarni kontejner sadrži izlijevanje ili curenje iz primarnog kontejnera. Oba kontejnera moraju biti kompatibilna sa otpadnim materijalom i ispunjavati savezne, državne i lokalne zahtjeve za skladištenje kontejnera.).
2.6 Nakon pražnjenja kontejnera za otpad, zatvorite ga priloženim čepom.
2.7 Okarakterizirajte (analizom ako je potrebno) otpad koji nastaje u određenim aplikacijama, reagensima i supstratima koji se koriste u vašoj laboratoriji.
2.8 Osigurajte da se otpad skladišti, prenosi, transportuje i odlaže u skladu sa svim lokalnim, državnim/pokrajinskim i/ili nacionalnim propisima.
2.9 Radioaktivni ili biološki opasni materijali mogu zahtijevati posebno rukovanje i mogu se primijeniti ograničenja odlaganja.
3.Biološki hazard sigurnost
Potencijalna biološka opasnost. U zavisnosti od uzoraka koji se koriste na ovom instrumentu, površina se može smatrati biološkom opasnošću. Koristite odgovarajuće metode dekontaminacije kada radite s biološkim opasnostima.
BIOHAZARD. Biološki uzorci kao što su tkiva, tjelesne tekućine, infektivni agensi i krv ljudi i drugih životinja imaju potencijal da prenesu zarazne bolesti. Pridržavajte se svih primjenjivih lokalnih, državnih/pokrajinskih i/ili nacionalnih propisa. Nosite odgovarajuću zaštitnu opremu, koja uključuje, ali nije ograničena na: zaštitne naočare, štitnik za lice, odjeću/laboratorijski mantil i rukavice. Sve radove treba izvoditi u propisno opremljenim objektima uz korištenje odgovarajuće sigurnosne opreme (na primjer, fizički uređaji za zadržavanje). Pojedinci bi trebali biti obučeni u skladu s primjenjivim regulatornim zahtjevima i zahtjevima kompanije/institucije prije rada s potencijalno zaraznim materijalima.
Pročitajte i slijedite primjenjive smjernice i/ili regulatorne zahtjeve u sljedećem:
U SAD: Smjernice Ministarstva zdravlja i ljudskih službi SAD objavljene u Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories nalaze se na: www.cdc.gov/biosafety.
Standardi za sigurnost i zdravlje na radu, Patogeni koji se prenose krvlju (29 CFR§1910.1030), nalaze se na:
www.access.gpo.gov/nara/cfr/waisidx_01/29cfr1910a_01.html
Protokoli Programa biološke sigurnosti vaše kompanije/institucije za rad sa/rukovanje potencijalno zaraznim materijalima. Dodatne informacije o smjernicama za biohazard dostupne su na: www.cdc.gov.
U EU: Provjerite lokalne smjernice i zakonodavstvo o biološkoj opasnosti i merama predostrožnosti u pogledu biološke sigurnosti i uputite se na najbolje prakse objavljene u Laboratorijskom priručniku o biološkoj sigurnosti Svjetske zdravstvene organizacije (WHO), treće izdanje, koji se nalazi na: www.who.int/csr/resources/publications /biosafety/WHO_CDS_CSR_LYO_200 4_11/en/.